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1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA Kit

更新時(shí)間:2025-12-13

簡(jiǎn)要描述:

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產(chǎn)品名稱

1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA Kit

英文名稱

1,3- diphosphoglycerate (1,3-DPG) ELISA Kit

貨號(hào)

BH-G63213

試劑和器材:
1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等

試劑盒組成及試劑配制
1.酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
2.
標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1100
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1100
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
9.
濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10.
終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事項(xiàng):
1加樣:
實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差;
加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件;
1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察;
96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成邊緣效應(yīng),因此盡量采用水??;
3.洗板:
手工洗板時(shí),拍板時(shí)要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出;
為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)(TMB)為底物,則提供的底物為AB兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)(TMB)為底物的試劑則不需避光,但AB液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。
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操作流程:
稀釋——加樣——溫育——配液——洗滌——加酶——溫育——洗滌——顯色——終止——測(cè)定
1.有質(zhì)量問題免費(fèi)包換,合同上注明了的(質(zhì)量問題包括運(yùn)輸不當(dāng),客戶在使用過程中測(cè)不出結(jié)果,等等!)
2.全程技術(shù)指導(dǎo).(包括售前的標(biāo)本收集,使用過程中不明白的地方,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析,有任何疑問,我們技術(shù)都會(huì)即時(shí)給你去電)
3.提供免費(fèi)代測(cè)的服務(wù)。(你只需把標(biāo)本寄過來,我們?yōu)槟愎?jié)省時(shí)間,幫你出結(jié)果,原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù)均可提供,一般時(shí)間是5天左右)
4.客戶有任何問題,我們都是在一個(gè)工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠(chéng)為客戶服務(wù)!
為什么實(shí)驗(yàn)過程中孵育、洗滌需要振蕩、如何振蕩。
振蕩孵育使反應(yīng)更充分,振蕩洗滌使背景更干凈。建議使用酶標(biāo)96孔微孔板振蕩器。
孵育過程振蕩,可以加快、加強(qiáng)抗原抗體分子間的相互碰撞接觸,使得反應(yīng)過程更加*,OD值通常會(huì)比未振蕩孵育的結(jié)果要高;洗滌過程振蕩,可以使洗板更干凈,在很大程度上能降低背景值,同時(shí)可以提高試劑盒檢測(cè)的靈敏度,具體操作請(qǐng)參見說明書。

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